
簡要描述:實驗中導致外泌體等細胞外囊泡(EV: Extracellular Vesicle)減少的原因多種多樣,其中,對樣品管等實驗耗材的吸附是EV損失的主要原因,EV研究的指南《MISEV2023》中也指出,純化后的EV易吸附于儲存容器1)。使用蛋白質低吸附管可有效防止EV吸附樣品管2-3),但實驗中使用的塑料制品不止樣品管,還有移液器槍頭和離心管等,要將這些耗材全部替換為低吸附耗材并不容易。
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實驗中導致外泌體等細胞外囊泡(EV: Extracellular Vesicle)減少的原因多種多樣,其中,對樣品管等實驗耗材的吸附是EV損失的主要原因,EV研究的指南《MISEV2023》中也指出,純化后的EV易吸附于儲存容器1)。使用蛋白質低吸附管可有效防止EV吸附樣品管2-3),但實驗中使用的塑料制品不止樣品管,還有移液器槍頭和離心管等,要將這些耗材全部替換為低吸附耗材并不容易。
添加保存穩定劑至樣品或純化EV溶液中在可操作性和多功能性方面提供了出色的解決方案。FUJIFILM Wako開發的EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(產品編號:058-09261)僅需添加至樣品或純化EV溶液中,即可抑制樣品管、移液器槍頭和離心管上的吸附。另外,本產品也具有保護EV免受凍融損傷的作用。FUJIFILM Wako還提供專用于動物給藥和通過TFF純化EV的EV-Save™ 系列產品。
產品陣容

◆EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定試劑(超濾用)
本產品是一款可抑制EV吸附于樣品管或移液槍槍頭等實驗耗材的聚合物試劑。可抑制實驗中以及保存過程中產生的EV損失,從而提高回收率。此外,它還具有保護EV免受凍融傷害的效果。建議在EV的過濾、純化和保存前添加本產品至樣品中。
特點
● 抑制樣品管和移液器槍頭等的EV吸附
● 保護EV免受反復凍融的損傷
● 操作簡便,僅需將EV-Save™(超濾用)直接添加至樣品或純化EV溶液中即可
推薦樣品
● 細胞培養上清
● 純化EV溶液
※ 在血清、血漿和干擾物質含量高的樣品中,難以獲得理想的防吸附效果。
對實驗分析的影響
已確認添加EV-Save™不影響以下實驗的外泌體分析:
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微陣列
- 細胞培養
※ EV-Save™(超濾用)(產品編號:058-09261)含有聚合物。若聚合物會影響后續的實驗結果,請勿使用本產品。
數據
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™(超濾用)至使用PS親和法純化的COLO201細胞來源EV,靜置3 min。然后,移至新的樣品管中,重復本步驟。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)檢測樣品管內的EV含量(CD63信號)。 【結果】 將樣品移至新樣品管時,CD63的信號減弱。但通過添加了EV-Save™(超濾用)幾乎wan全抑制移液引起的信號減弱。 |
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▼冷凍保護效果
添加EV-Save™(超濾用)至使用PS親和法純化的COLO201細胞來源EV后進行凍融。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)檢測樣品管內的EV含量(CD63信號),使用透射電子顯微鏡分析EV的形態。
(1)ELISA | (2)電子顯微鏡 |
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【結果】 未添加EV-Save™(超濾用)的樣品凍融后,CD63信號減弱。但通過添加EV-Save™(超濾用)可抑制凍融引起的信號減弱。電子顯微鏡下也可以觀察EV-Save™(超濾用)抑制了粒子數的減少。 | |
◆EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(in vivo 用)
本產品的組成成分僅使用具有藥物添加劑實例的成分,是一款可用于EV給藥實驗動物的EV吸附抑制劑和冷凍保護劑。
特點
● 抑制樣品管和移液器槍頭等的EV吸附
● 保護EV免受反復凍融的損傷
● 操作簡便,僅需將EV-Save™直接添加至樣品或純化EV溶液中即可
● 組成成分使用可排出體外的分子量以及具有藥物添加劑實例的成分
推薦樣品
● 細胞培養上清
● 純化EV溶液
※ 在血清、血漿和干擾物質含量高的樣品中,難以獲得理想的抗吸附效果
對實驗分析的影響
已確認添加EV-Save™不影響以下實驗分析的外泌體分析:
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微陣列
- 細胞培養
※ 超濾時請選擇EV-Save™(超濾用)(產品編號:058-09261)
數據
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™(超濾用)和EV-Save™(in vivo 用)至PS親和法純化的COLO201細胞來源外泌體,在4℃下存儲16 h。然后使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)檢測樣品管內的CD9信號。
【結果】 未添加EV-Save™的樣品中,CD9信號減弱,但添加了EV-Save™(超濾用)和EV-Save™(in vivo 用)的樣品后可抑制信號減弱。 |
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▼冷凍保護效果
添加EV-Save™(超濾用)和EV-Save™(in vivo 用)至PS親和法純化COLO201細胞來源EV,反復凍融1或3次。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)檢測樣品管內的EV含量(CD9信號)。
【結果】 未添加EV-Save™的樣品中,凍融后CD9信號減弱。但添加EV-Save™(超濾用)和EV-Save™(in vivo 用)后可抑制信號減弱。 |
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◆EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(TFF用)
切向流過濾法(TFF)作為一種高效的方法被用于細胞外囊泡(EV)濃縮和緩沖液置換。TFF通過將樣品與濾膜平行流動來防止樣品在濾膜上堆積,盡可能地減少樣品損失。另外,EV等易吸附的樣品由于膜吸附和過濾操作中的物理應力,回收率可能會降低。
本產品旨在通過減輕TFF處理過程中的物理應力以及膜的吸附來提高EV回收率。使用本產品可實現高效、穩定的EV回收。
特點
● 抑制使用TFF進行EV純化、濃縮和緩沖液置換過程中的EV損傷和EV對濾膜的吸附
● 操作簡便,僅需向樣品添加本產品和平衡緩沖液
● 本產品可防止因吸附于試管而導致的EV損失,并防止凍融損傷,過濾后(TFF)的EV溶液可以直接保存。
(注:僅在緩沖液交換過程中添加本產品才能達到此效果)
推薦樣品
● 純化的EV
● 細胞培養上清
※ 在血清、血漿和雜志含量高的樣品中,難以獲得理想的防吸附效果。
性能數據
▼提高緩沖液置換過程中純化的 EV 的回收率
使用MassivEV™ EV Purification Column PS(產品編號:131-19491)從骨髓來源間充質干細胞(BMMSC)和脂肪組織來源間充質干細胞(ADMSC)的細胞培養上清中純化EV。然后,使用Repligen的TFF系統,更換添加了本產品1/100量的HBS 緩沖液進行緩沖液交換。使用PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP)(產品編號:298-80601,檢測抗體使用抗CD63或抗CD81抗體),評估緩沖液置換后的EV回收率。,EV粒子粒徑分布則使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)進行檢測。
(1)ELISA

【結果】
通過添加本產品,可以觀察到基于TFF置換緩沖液中EV的回收率升高。
(2)NTA

【結果】
添加本產品后,純化EV粒子粒徑分布并未觀察到明顯變化。
▼提高基于TFF從細胞培養上清中純化EV的回收率
使用TFF將細胞培養上清濃縮20倍,然后用100倍的緩沖液進行置換。將本品以1/100的量添加至細胞培養上清液和置換緩沖液中。使用CD63和CD81的ELISA試劑盒檢測EV的回收率,使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)檢測EV粒子粒徑分布。
(1) ELISA

【結果】
通過添加本產品,可以觀察到從細胞上清中純化EV的回收率有所提升。
(2) NTA

【結果】
添加本產品后, EV的粒子粒徑分布并未觀察到明顯變化。
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| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 058-09261 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(超濾用) | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 050-09461 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for in vivo EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(動物體內實驗用) | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 059-09671 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for TFF EV-Save™ 細胞外囊泡保存穩定劑(TFF用) | 20 mL | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 294-84101 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌體提取試劑盒PS Ver.2 | 2 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-84103 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌體提取試劑盒PS Ver.2 | 10 Tests | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 293-96401 | MagCapture (TM) EV Isolation Kit PS for HTS HTS用MagCapture™ EV提取試劑盒PS | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 131-19491 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 細胞外囊泡(EV)純化分離柱 PS | 1 mL | 基因研究用 | - |
| 137-19493 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 細胞外囊泡(EV)純化分離柱 PS | 5 mL | 基因研究用 | - |
| 295-96601 | MassivEV™ Purification Buffer Set MassivEV™ 細胞外囊泡(EV)純化緩沖液套裝 | 1mL×10回用(5mL×2回用) | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 294-84601 | microRNA Extractor(R) Kit for Purified EV 純化細胞外囊泡(EV)用miRNA提取試劑盒 | 20 Tests | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 297-79201 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD) PS Capture™外泌體ELISA試劑盒(抗小鼠IgG POD) | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 298-80601 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) PS Capture™外泌體ELISA Kit (鏈霉親和素HRP) | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 296-83701 | CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-83601 | CD63-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD63-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 292-83801 | CD81-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 Tests | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 297-79701 | PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit PS Capture™外泌體流式試劑盒 | 300 Tests | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 014-27763 | Anti CD9, Monoclonal Antibody (1K) 抗CD9單克隆抗體(1K) | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 013-27951 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 20 μL | 免疫化學用 | - |
| 019-27953 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 013-28171 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 20 μL | 免疫化學用 | - |
| 019-28173 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 017-28211 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化學用 | - |
| 012-27063 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) 抗CD63單抗(3-13) | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 019-27713 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Biotin Conjugated 抗CD63單克隆抗體(3-13),sheng物素偶聯 | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 014-27643 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Fluorescein Conjugated 抗CD63,單克隆抗體(3-13),熒光素結合 | 100 Tests | 免疫化學用 | - |
| 011-27751 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63單克隆抗體(3-13),紅色熒光染料(635)偶聯 | 25 Tests | 免疫化學用 | - |
| 017-27753 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63單克隆抗體(3-13),紅色熒光染料(635)偶聯 | 100 Tests | 免疫化學用 | - |
| 011-27773 | Anti CD81, Monoclonal Antibody (17B1) 抗CD81單克隆抗體(17B1) | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 014-28221 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 20 μL | 免疫化學用 | - |
| 010-28223 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 100 μL | 免疫化學用 | - |
| 011-28111 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody (9B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化學用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 343-09661 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 外泌體膜染色熒光試劑盒(Green) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 340-09671 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 外泌體膜染色熒光試劑盒(Red) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09681 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red 外泌體膜染色熒光試劑盒(Deep Red) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09691 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 外泌體蛋白質熒光染色試劑盒(Green) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09701 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 外泌體蛋白質熒光染色試劑盒(Red) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09711 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red 外泌體蛋白質熒光染色試劑盒(Deep Red) | 5 samples | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 052-09301 | Exosomes, from COLO201 cells, purified COLO201來源外泌體(已純化) | 50 μL | 基因研究用 | - |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 132-19345 | MSCultureTM High Growth Basal Medium MSCulture™ 生長用基礎培養基 | 500 mL | 細胞培養用 | - |
| 133-19331 | MSCultureTM High Growth Supplement MSCulture™ 生長用補充劑 | 5 mL | 細胞培養用 | - |
| 053-09451 | EV-Up(TM) EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™ 間充質干細胞外泌體生產用基礎培養基,無動物源成分 | 95 mL | 細胞培養用 | - |
| 298-84001 | EV-Up(TM) MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™ 間充質干細胞外泌體生產用添加劑,無動物源成分 | 100 mL用 | 細胞培養用 | - |
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