簡(jiǎn)要描述：外泌體是細(xì)胞釋放到胞外的一種微小囊泡，由細(xì)胞膜內(nèi)陷形成，然后被夾斷并釋放到周圍環(huán)境中。外泌體的直徑通常約為30~100 nm，由脂質(zhì)雙分子層組成，包含蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì)。
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外泌體生物合成抑制劑
手霉素A
外泌體是細(xì)胞釋放到胞外的一種微小囊泡，由細(xì)胞膜內(nèi)陷形成，然后被夾斷并釋放到周圍環(huán)境中。外泌體的直徑通常約為30~100 nm，由脂質(zhì)雙分子層組成，包含蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì)。
外泌體在細(xì)胞間通訊中發(fā)揮重要作用，并參與眾多的生理和病理過程。它們還可作為細(xì)胞間分子運(yùn)輸?shù)拿浇椋瑤椭{(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，并調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化以及凋亡。近期研究發(fā)現(xiàn)，外泌體還是癌癥和其他疾病的潛在診斷標(biāo)志物，而另外一些研究則著手研發(fā)使用外泌體將治療分子遞送到特定細(xì)胞或組織。
RAS信號(hào)通路直接調(diào)控多種物質(zhì)進(jìn)入外泌體。RAS蛋白是一類small GTPases，在細(xì)胞信號(hào)通路中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
法尼基轉(zhuǎn)移酶（FTase）負(fù)責(zé)向RAS蛋白添加法尼基，這是其在細(xì)胞內(nèi)維持正常功能和亞細(xì)胞定位的基本步驟。
手霉素A是一種天然的抗生素，被確認(rèn)為外泌體生物合成和分泌的抑制劑。手霉素A是FTase的選擇性抑制劑，可通過抑制RAS的法尼基化從而抑制RAS/RAF/ERK1/2的信號(hào)，并減少外泌體的生成量。靶向外泌體生物合成可能是RAS信號(hào)抑制劑發(fā)揮其抗癌作用的關(guān)鍵。
圖：外泌體生物合成和抑制的示意圖（改編自M. Catalano & L. O'Discroll; J. Extracell. Vesicles 9, 1703244 (2019)。）
參考文獻(xiàn)
1. | Manumycin A and Its Analogues Are Irreversible Inhibitors of Neutral Sphingomyelinase: C. Arenz, et al.; Chem. Biochem. 2, 141 (2001) |
2. | Manumycin A suppresses exosome biogenesis and secretion via targeted inhibition of Ras/Raf/ERK1/2 signaling and hnRNP H1 in castration-resistant prostate cancer cells:A. Datta, et al.; Cancer Lett. 408, 73 (2017) |
3. | Manumycin A Is a Potent Inhibitor of Mammalian Thioredoxin Reductase?1 (TrxR-1): A. Tuladhar & K.S. Rein; ACS Med. Chem. Lett. 9, 318 (2018) |
4. | Inhibiting extracellular vesicles formation and release: a review of EV inhibitors: M. Catalano & L. O’Driscoll; J. Extracell. Vesicles 9, 1703244 (2019) (Review) |
5. | Role of Ceramides and Lysosomes in Extracellular Vesicle Biogenesis, Cargo Sorting and Release: R. Horbay, et al.; Int. J. Mol. Sci. 23, 15317 (2022) (Review) |
6. | Exosome biogenesis: machinery, regulation, and therapeutic implications in cancer: Q.-F. Han, et al.; Mol. Cancer 21, 207 (2022) (Review) |
7. | Analyzing the postulated inhibitory effect of Manumycin A on farnesyltransferase: A. Hagemann, et al.; Front. Chem. 10, 967947 (2022) (Review) |
◆手霉素A
手霉素A是一種高效、選擇性、競(jìng)爭(zhēng)性的細(xì)胞滲透性RAS-法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，同時(shí)也是一種不可逆的中性中性鞘磷脂酶抑制劑。
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手霉素A已被發(fā)現(xiàn)具有多種生物活性，包括：
● 抗菌活性：針對(duì)多種細(xì)菌，包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。其中對(duì)耐jia氧西林jin黃色葡萄球菌 (MRSA) 和其他耐抗生素細(xì)菌的效果較好。
● 抗腫瘤活性：針對(duì)各種癌細(xì)胞系，包括乳腺癌、卵巢癌和肺癌。通過誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡（細(xì)胞程序性死亡）、抑制腫瘤的血管生成來發(fā)揮作用。
● 抗炎活性：抑制促炎癥分子（如TNF-α和IL-6）的生成。
● 抑制外泌體活性： 抑制外泌體的生成和釋放。
● 免疫調(diào)節(jié)活性： 通過增加特定免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的生成來調(diào)控免疫系統(tǒng)。
AdipoGen Life Sciences是手霉素A的原始制造商，庫(kù)存充足！
產(chǎn)品規(guī)格
CAS：52665-74-4
來源：從海洋放線菌（Streptomyces parvulus）中分離
純度：≥98% HPLC
檢測(cè)方式：經(jīng)1H-NMR檢測(cè)
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其他外泌體生物合成的小分子調(diào)節(jié)劑及衍生物
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
BVT-0078 | Palmarumycin C3 | RAS-法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑 |
AG-CN2-0143 | Altenusin | 非競(jìng)爭(zhēng)性 nSMase 抑制劑 |
AG-CN2-0458 | Arglabin | RAS-法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑 |
AG-CN2-0158 | OM173-alphaA | RAS 競(jìng)爭(zhēng)性非CAAX模擬型 法尼基轉(zhuǎn)移酶 (FTase) 抑制劑 |
AG-CN2-0144 | Andrastin A | 蛋白法尼基轉(zhuǎn)移酶（PFTase) 抑制劑 |
BVT-0264 | Manumycin B | RAS-法尼基轉(zhuǎn)移酶（FTase) 抑制劑 |
BVT-0414 | Dihydromanumycin A | 手霉素A的衍生物，尚未測(cè)試其生物活性 |
BVT-0158 | Deoxymanumycin A | 手霉素A的衍生物，尚未測(cè)試其生物活性 |
◆外泌體標(biāo)志物標(biāo)準(zhǔn)品
高靈敏度和高特異性的抗體是檢測(cè)包括外泌體在內(nèi)的細(xì)胞外囊泡（EVs）的重要工具，其表達(dá)的抗原往往與細(xì)胞對(duì)應(yīng)物不同，具有三維構(gòu)象和/或翻譯后修飾。四跨膜蛋白CD9、CD63和CD81是文獻(xiàn)報(bào)道中最常見的EV相關(guān)標(biāo)志物，在ELISA、流式細(xì)胞術(shù)和芯片實(shí)驗(yàn)室分析等多種研究中被用于EV的捕獲。上述四跨膜蛋白都被證明在EV的生物發(fā)生或篩選中發(fā)揮了積極的作用，這表明它們?cè)贓V的分泌路徑中至關(guān)重要。Ancell可提供高特異性及高靈敏度的抗體，可用于外泌體的檢測(cè)和捕獲。同時(shí)Ancell還能提供大量額外的抗原特異性抗體，可根據(jù)抗原的特征對(duì)EV種群進(jìn)行表型分析。
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特異性Tetraspanin [TSPAN] 抗體： 外泌體膜生物標(biāo)志物
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
ANC-156- | anti-CD9 (human), mAb (SN4) | 識(shí)別人CD9 [TSPAN-29]， 用于流式細(xì)胞術(shù) |
ANC-186- | anti-CD37 (human), mAb (IPO-24) | 識(shí)別人CD37 [TSPAN26]， 用于流式細(xì)胞術(shù) |
ANC-204- | anti-CD53 (human), mAb (63.5A3) | 識(shí)別人CD53 [TSPAN25]， 用于流式細(xì)胞術(shù) |
ANC-215- | anti-CD63 (human), mAb (AHN16.1) | 識(shí)別人CD63 [TSPAN30]， 用于流式細(xì)胞術(shù)，免疫組化 |
ANC-302- | anti-CD81 (human), mAb (1.3.3.22) | 識(shí)別人CD81 [TSPAN28]， 用于流式細(xì)胞術(shù)和WB |
◆Tim-4：外泌體捕獲/篩選生物標(biāo)志物
Tim-4（T細(xì)胞免疫球蛋白和粘蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4）是一種單lianI型膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族和TIM家族。Tim-4含有一個(gè)Ig樣V型（免疫球蛋白樣）結(jié)構(gòu)域，在樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上表達(dá)。Tim-4在T輔助2型（Th2）細(xì)胞的增殖中起重要作用。Tim-4以鈣依賴的方式與凋亡細(xì)胞表面的磷脂酰si氨酸（PS）結(jié)合，并介導(dǎo)凋亡細(xì)胞的吞噬作用。
由于EV膜富含磷脂酰si氨酸（PS），因此Tim-4可與EVs表面的PS結(jié)合。華山力成教授團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種新型親和方法，在一項(xiàng)新方案中描述了一種基于親和力分離EVs的方法：使用與Tim-4-sheng物素偶聯(lián)的lian霉親和素磁珠，以鈣依賴的方式捕獲EVs。通過將sheng物素親和的 Tim-4 結(jié)合到lian霉素磁珠上，在鈣離子存在的情況下，進(jìn)行 EVs 的分離。該方法可以用于替代目前常用的超速離心法來進(jìn)行 EVs 的純化。這種全新的 Tim-4 親和法與其他方法相比（如超離法、PEG 沉淀法、抗體免疫沉淀法），可以獲得更好的產(chǎn)率、純度，以及分離多種群 EVs。目前針對(duì)或利用EVs進(jìn)行治療和診斷方法的研究盛行，因此開發(fā)分離和量化EVs的理想方法將是一個(gè)活躍的研究領(lǐng)域。
參考文獻(xiàn)
1. | A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles: W. Nakai, et al.; Sci. Rep. 6, 33935 (2016) |
2. | High purity isolation and sensitive quantification of extracellular vesicles using affinity to Tim-4: T. Yoshida, et al.; Curr. Prot. Cell Biol. 77, 3.45.1-3.45.18 (2017) |
3. | Bifurcated Asymmetric Field Flow Fractionation of Nanoparticles in PDMS-Free Microfluidic Devices for Applications in Label-Free Extracellular Vesicle Separation: M. Priedols, et al.; Polymers 15, 789 (2023) |
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
AG-40B-0180B | Tim-4 (mouse):Fc (human) (rec.) (Biotin) | 用于分離細(xì)胞外囊泡 |
AG-40B-0180 | Tim-4 (mouse):Fc (human) (rec.) (Biotin) | 用于分離細(xì)胞外囊泡 |
CHI-MF-110T4 | Tim-4 (mouse):Fc (mouse) (rec.) | 用于分離細(xì)胞外囊泡 |
CHI-HF-211T4 | Tim-4 (human):Fc (mouse) (rec.) | 用于分離細(xì)胞外囊泡 作用對(duì)象：人 |
CHI-HF-210T4 | Tim-4 (human):Fc (human) (rec.) | 用于分離細(xì)胞外囊泡 |
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) | 備注 |
| BVT-0414-M001 | Dihydromanumycin A 二氫手霉素 A | 1 mg | - | - |
| BVT-0264-M001 | Manumycin B 手霉素B | 1 mg | - | - |
| BVT-0158-M001 | Deoxymanumycin A 法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑 | 1 mg | - | - |
| BVT-0139-C250 | Rebeccamycin 瑞拜克 | 250 µg | - | - |
| BVT-0139-M001 | Rebeccamycin 瑞拜克 | 1 mg | - | - |
| BVT-0100-C250 | Chrysomycin B jin黃霉素B | 250 µg | - | - |
| BVT-0100-M001 | Chrysomycin B jin黃霉素B | 1 mg | - | - |
| BVT-0099-C250 | Chrysomycin A jin黃霉素A | 250 µg | - | - |
| BVT-0099-M001 | Chrysomycin A jin黃霉素A | 1 mg | - | - |
| BVT-0095-M001 | Pyrrolcarbonyltaloside | 1 mg | - | - |
| BVT-0095-M005 | Pyrrolcarbonyltaloside | 5 mg | - | - |
| BVT-0070-M001 | Mutolide | 1 mg | - | - |
| BVT-0070-M005 | Mutolide | 5 mg | - | - |
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